你听说过PCR检测吗？它到底是什么意思，这篇文章给你讲解它的核心原理和三个关键步骤，把数据和实践结合起来，让你能在一分钟内弄明白。
在生物医学领域里面，聚合酶链式反应（PCR）是一项具备革命性的技术，简单来说，PCR就好像一个高效的基因复印机，依靠人工操作把微量DNA进行指数级的复制，在实际情况中，实验提取的DNA样本浓度特别低，常常要依靠PCR技术扩增成千上万甚至数百万倍之后，才可以运用到疾病检测、基因测序这类领域当中。
一、PCR核心技术三步曲
一个标准的PCR反应是如何进行的？它离不开以下三个循环的步骤，其作用与参数至关重要。
第一步：高温“拆解”——变性
这是PCR反应的开端。利用高温（通常90～95℃）破坏DNA双链间的氢键，使双链解离为单链，为后续复制做好准备。这一步的时间和温度取决于DNA片段的GC含量、长度以及缓冲液环境。
第二步：精准“定位”——退火
温度有略微降低，通常处于引物熔解温度以下三，到五摄氏度（大约五十到六十五摄氏度），会持续零点五到两分钟，在这个时候，设计好的引物就会好像钥匙一样，精确地结合到目标单链DNA的特定位置上，引物的熔解，温度（Tm）是百分之五十序列形成双链时的临界温度，是设定退火温度的重要根据所在。
第三步：高效“合成”——延伸
当温度处于70到75摄氏度时，热稳定的DNA聚合酶发挥着复制作用，它把dNTP当作原料，将目的DNA链当作模板，依照碱基互补配对的规则，快速合成出一条与模板互补的新，DNA链。
普通片段的延伸一般在几十秒内就能完成，如果扩增目标超过10kb，那就需要适当延长反应时间，还得不时调整温度和循环参数，整个循环过程一般要重复25到40次，从理论上来说DNA能以2的n次方的速度指数增长，经过30次循环后，大概能得到10亿份拷贝。
二、高效变体：两步法PCR
如果引物的退火温度，和延伸温度相差不超过3℃，这样还能够采用更简便的两步法PCR，它把退火和延伸合并到一块儿，省去了中间那些温度变化以及稳定的时间，整个循环周期可以缩短大概20%到40%，这样就提高了实验效率。